酚-氯仿法提取DNA
酚-氯仿法是分子生物学中最经典、应用最广泛的DNA提取方法之一。该方法利用DNA、蛋白质和脂质在不同溶剂中溶解性的差异，通过液-液萃取实现核酸的分离与纯化。 基本原理 在细胞裂解后，向样品中加入一定比例的酚、氯仿和异戊醇混合液（通常为25:24:1）。酚作为蛋白质的强变性剂，能使蛋白质变性并使其溶解于有机相；氯仿有助于增强有机相与水相的分离，并去除溶液...
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LEARNING CENTER
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TRIzol试剂抽提RNA
TRIzol试剂是一种基于异硫氰酸胍和苯酚的单相溶液，广泛应用于总RNA的提取。 基本原理 TRIzol试剂含有异硫氰酸胍和苯酚等主要成分。异硫氰酸胍是一种强力的蛋白质变性剂，同时能够有效抑制内源和外源RNase的活性，从而保护RNA免受降解。在样品匀浆或裂解后，加入氯仿进行相分离，经离心后混合物分为三层：上层为含RNA的透明水相，中间为变性的蛋白质层...
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硅胶膜纯化柱抽提法提取RNA
硅胶膜纯化柱法（亦称离心柱法或硅胶膜吸附法）是目前商品化RNA提取试剂盒中最常用的技术之一。该方法利用硅胶膜在高盐条件下选择性结合RNA，并通过简单的离心步骤实现核酸的纯化，因其操作简便、安全无毒且易于标准化，已成为实验室日常RNA提取的主流选择。 基本原理 硅胶膜纯化柱法的核心在于固相吸附技术。样品经裂解液（通常含有异硫氰酸胍等离液盐）处理，使细胞破...
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琼脂糖凝胶电泳
琼脂糖凝胶电泳是分子生物学实验室中最基础、最普及的核酸分析技术之一。它利用琼脂糖凝胶作为支持介质，在电场作用下依据核酸片段的大小进行分离，不仅是PCR产物验证、酶切鉴定和基因组DNA质量评估的首选方法，同样广泛应用于总RNA完整性检测和Northern blot分析等RNA研究场景。 基本原理 琼脂糖是从红藻中提取的线性多糖，加热溶解后冷却可形成具有网...
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